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食品中黄曲霉毒素的高效液相色谱法(HPLC)检测方案


【黄曲霉毒素】


黄曲霉毒素(AFT)是一类化学结构类似的化合物,均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus)和寄生曲霉 (a.parasiticus)产生的次生代谢产物,主要有B1,B2,G1,G2 以及另外两种代谢产物M1,M2,其中M1 和M2是从牛奶中分离出来的。B1为毒性及致癌性最强的物质。在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。它们存在于土壤、动植物、各种坚果中,特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品,是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素


【样品溶液的制备】


大米、玉米、小麦、花生及其制品:准确称取经过磨细(粒度小于 2 mm)的试样以及植物油脂:准确称取试样 25. 0 g于 250 mL具塞锥形瓶中(植物油:称取10g先用正己烷溶解,再用甲醇水溶解提取),加入 5. 0 g氯化钠及加人甲醇一水(7+3)至100.0 mL,以均质器高速搅拌提取 2 min。离心5min(转速6000r/min),准确移取上清液 15. 0mL 滤液置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,用微孔滤膜(0.45um)滤过,量取滤液20.0ml,通过免疫亲合柱,流速3ml/min,用水20ml洗脱,洗脱液弃去,使空气进入柱子,将水挤出柱子,再用适量甲醇洗脱,收集全部洗脱液,置2ml量瓶中,并用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。


【色谱条件】


碘衍生法色谱条件:

检测器:荧光检测器;XE:360nm,EM:440nm

碘衍生法:衍生泵流速:0.2mL/min; 衍生化温度70℃

流动相:(甲醇-乙腈)-水

流速:1.0mL/min

柱温:35℃

进样量:20uL


图1.jpg 


检测限:

AFG2:0。061ng/mL

AFG1:0.15 ng/mL

AFB2:0。04 ng/mL

AFB1:0。05 ng/mL


光化学衍生法色谱条件:

检测器:荧光检测器;XE:360nm,EM:440nm

光化学衍生法:254nm紫外灯光照衍生

流动相:(甲醇-乙腈)-水

流速:1.0mL/min

柱温:35℃

进样量:20uL


图3.jpg


检测限:

AFG2:0.023ng/mL

AFG1:0.083 ng/mL

AFB2:0。018 ng/mL

AFB1:0。077 ng/mL


高效液相色谱仪器配置】


高效液相色谱仪器配置

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